实验室里又开始忙碌起来,培养箱里嗷嗷待哺的细胞,给还沉浸在暑假生活的你添了一份真实,又要开始操心细胞的生长啦。顺利的时候,细胞乖乖的,长势喜人,可是不顺利的时候,就会出现各种各样的问题,细胞污染啦、生长缓慢啦、形态看着不对劲啦、死细胞漂一层啦......着实让人应接不暇。
毕竟细胞作为一种体外培养的物质,受许多外界的影响,培养基、血清、孵育温度等等,还有一种影响因素就是抗生素,一般来说,抗生素不是细胞培养的必须品,注意无菌操作,实验室使用的新洁尔灭擦拭消毒、紫外照射都可以保证细胞的安全性,但对于新手小白来说,无菌操作一旦细节做得不到位,细胞会出现各种各样的情况,这时候我们可以用抗生素针对性的来解决这些问题。在原代细胞培养中,由于污染风险较高,通常会建议使用如青霉素-链霉素(双抗溶液)来减少污染发生的几率。我们来了解一些常见的抗生素种类及其作用。
青霉素和链霉素:这是最常使用的双抗(Penicillin-Streptomycin),通常被推荐用于细胞培养液中。其工作浓度分别为青霉素100U/ml和链霉素0.1mg/ml,主要是针对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌。
庆大霉素:与青霉素和链霉素一起使用时,形成三抗,这种组合可以更有效地防止微生物污染,工作浓度一般为50 μg/ml
两性霉素B:有时也会与青霉素和链霉素结合使用,形成三抗,以增强抗真菌效果。
卡那霉素:这是一种广谱抗生素,常用于细胞培养基中,以防止细菌污染。
氯霉素、红霉素、四环素:这些抗生素通过抑制蛋白质或核酸合成来发挥作用,从而影响微生物的生长,虽然它们在某些情况下可用于细胞培养,但一般不推荐常规使用。
但还是要提醒大家注意的是,抗生素也是有毒性的,有部分抗生素的药效浓度水平和毒性浓度还是比较接近的,对细胞有一定的影响。长期添加抗生素也会促使耐药株的产生,导致轻度污染一直存在,一旦暂停抗生素的使用,随之而来的严重污染可能会波及整个实验室。
所以污染问题还是要做好细胞房的消毒管理以及提高细胞培养过程中的无菌操作意识!