细胞是生物体基本的结构和功能单位,在目前医学、药学和生物学等领域,细胞都是科研实验中的重要组成环节,细胞学相关延伸在实验中的应用已经遍布了各个领域。无论是药物研究、基因表达还是疾病表现等等方面,都需要细胞培养来进行验证展示。
细胞培养操作,会因为实验人员的操作与整体实验环境的不同而受到较大的影响,两株相同的细胞在不同环境下通过不同实验人员的操作,所生长表现出的形态也会出现截然不同的反馈。在细胞相关实验中,每一个步骤都会有许多细节需要注意到,而正是这些细枝末节的问题,就会导致整个细胞培养的溃败。南京森贝伽生物深耕于细胞培养产线,今天干货鸭就会将众多细胞实验室中汇总出的细胞培养整理成《细胞培养操作指南》分享给大家,希望能够让各位科研同学的细胞培养实验带来帮助。
细胞培养疑问汇总
新获得细胞处理
细胞获得途径主要有留存、购买、转赠等途径,在得到新细胞的第一件事就是观察外观,首先需要确认培养瓶是否破损漏液,整体封口膜是否完好,如果是冻存细胞则需要观察冻存管是否有裂缝,整体是否保存完好。
新细胞的培养条件
每一款细胞都会有不同的培养体系,部分细胞可能会适配多种培养体系,但是不能直接更改,因为细胞在传代过程中都是经过该培养体系进行驯化的,如果临时更改,就会导致细胞出现应激反应,严重的会导致细胞大面积死亡。
外购细胞的错误处理
在外部购买细胞后发现细胞活率低、不贴壁乃至死亡,可能导致的原因可能会有:没有继续使用配套培养体系或者自用配套产品品质不达标;血清浓度选择错误;细胞解冻时间过久;悬浮细胞/未贴壁细胞误认为死细胞;二氧化碳培养箱故障;细胞收货后放置在-80℃冰箱太久。
冻存管细胞注意事项
在用镊子或止血钳取冻存管时用力不当或者是冻存管质量不佳容易导致冻存管破裂。从液氮中取出后封口膜会变脆,需要更加注意瓶盖松动或脱落。