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重组肠激酶(Enterokinase、EK酶) | |
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一、重组肠激酶说明
肠激酶(Enterokinase, light chain)是一种高度专一性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白酶,在Lys的C端水解多肽。它可以将胰蛋白酶原转变为胰酶,也可以将带有这个识别序列的融合蛋白切开。由于肠激酶具有高度专一性,水解效率高的特点,它被广泛地应用于基因工程产品的开发,其应用之一是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂,尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。
二、 产品优势
优势1:专业的重组蛋白生产工艺,由酵母分泌表达的高纯度、高活性的重组牛肠激酶。
优势2:经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测目的带单一清晰;不含非特异性的蛋白酶切活性。
优势3:高活性,0.03U的EK酶16小时即可将15μg的Thioredoxin-NP-27切割完全。
优势4:,适用范围广(4-45℃,pH4.5-9.5),在各种去垢剂和变性剂存在下仍具有部分活性。
优势5:切割后蛋白的N端与天然蛋白N端相同。
三、反应条件
1×重组牛肠激酶反应缓冲液:
50mM Tris-HCl,pH 8.0(22℃),1mM CaCl2,0.1% Tween-20。
四、应用实例
图例 重组牛肠激酶酶切反应:
每个反应含有15μg的Thioredoxin-NP-27和不同数量的肠激酶。在37℃经过16小时的反应后用15℃的SDS-PAGE胶检测酶切效果。每个反应所含的酶量分别为:
Lane A: No rEK Lane B: 0.0008 units Lane C: 0.0015 units Lane D: 0.003 units
Lane E: 0.008 units Lane F: 0.015 units Lane G: 0.03 units