1. 将鸡蛋敲个小洞,将注射器插入蛋黄中吸取蛋黄。
2. 将蛋黄1:9用超滤水稀释,用稀盐酸调pH到5.2。
3. 4℃过夜,待其自然分层,吸取上清。
4. 向上清中加入-20℃预冷冰乙酸,使其终浓度为60%,4℃搅拌20min。10,000rpm离心30min,弃上清。
5. 向沉淀中加入0.16%NaCl溶液。
6. 三层滤纸过滤,收集过滤液。
7. 滤液中加入-20度预冷的冰乙醇,使其终浓度达到30%,10,000rpm 离心25min,弃上清。
8. PBS溶解沉淀,即得到IgY抗体溶液。
9. 进行SDS-PAGE分析纯度和定量。
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