单克隆抗体的生产
大量生产单克隆抗体的方法主要有三种:1、大量培养杂交瘤细胞,从细胞培养上清液中获取单克隆抗体,一般细胞培养液内的抗体含量为10~60μg/ml;
2、将对数生长期的杂交瘤细胞按1~3×10^7/ml接种于小鼠皮下,每处注射0.2ml,每只注射2~4个点,待10~20天左右即可进行采血,从血清中获得的单克隆抗体的含量可达1~10mg/ml;
3、小鼠腹腔注射适量佐剂后,将杂交瘤细胞按照1~2×10^6cell/只的量打进腹腔。在小鼠濒死时收集腹水,一般一只小鼠可获得5~10ml腹水,腹水中单克隆抗体含量可达5~10mg/ml。
腹水制备实验流程
1、将佐剂注射BALB/C小鼠腹腔,每只0.3~0.5ml处理腹腔15天左右(一般12-18天)。然后将筛选出来的杂交瘤细胞株进行扩大培养后接种到Balb/c小鼠腹腔内, 建议每只注射80万-100万个细胞。腹水会比普通佐剂晚出1.5~2天,但通常情况下腹水的量是普通佐剂出量的 1.5~2倍,且单抗腹水效价不变;
2、将筛选出来的杂交瘤细胞株进行扩大培养后接种到Balb/c小鼠腹腔内, 建议每只注射80~100万个细胞;
3、注射细胞7天左右小鼠腹部会开始肿胀,此时每日都应进行观察,以防小鼠突然死亡,当小鼠出现进食困难,行走不便,毛色暗沉时将小鼠处死,进行一次性腹水的提取;
4、小鼠脱颈椎处死,于75%酒精浸泡消毒5min;
5、用手术剪将小鼠腹部剪开一个小口,剥离周围皮肤露出腹腔,随后将腹腔剪开一个小口,将胶头滴管伸入腹腔内将积液吸取至干净的15ml离心管内;
6、3000rpm,10min离心,无色透明的中间层即为腹水。
备注:离心后可以将腹水转移至新的离心管内-20℃冻存(上层为矿物油层,下层为细胞层),也可与灭菌甘油等比混匀后放于-20℃冰箱长期保存。
博奥龙特色腹水佐剂
货号 | 规格 | 价格 |
KX0210048-10 | 10ml | 100 |
KX0210048-500 | 500ml | 3160 |
备注:大批量采购可享受梯度优惠价格
使用方法:
将佐剂注射BALB/C小鼠腹腔,每只0.3-0.5ml处理腹腔15天左右(一般12-18天),然后注射杂交瘤细胞, 建议每只注射80万-100万个。腹水会比普通佐剂晚出1.5天-2天,但通常情况下腹水的量是普通佐剂出量的 1.5-2倍,且单抗腹水效价不变。
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博奥龙是一家由留学归国人员创办的生命科学领域技术研发型企业,专业从事新型生化试剂的研发和销售。公司理念是通过自主创新的品牌产品改变传统实验模式,使生命科学研究变得更轻松、更高效。
公司成立八年多来推出了上万种自主品牌产品,其中包括QuickAntibody™免疫佐剂、QuickShuttle™转染试剂、QuickFreezing™细胞冻存液、QuickVerification™胶体金检测卡、Hybridoma Feeder添加因子和Pan-HPV™ HPV L1抗体等多种独特的自主知识产权产品。秉承“专业、创新”的理念,公司将继续在擅长专业领域做强做大,为客户提供更多的创新产品和服务,力争成为国际知名的品牌生化试剂公司。
公司主要产品有抗体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗体、近300种病理级抗体、近3000余种病毒蛋白及病毒抗体,另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。
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