上海延慕ELISA试剂盒供应商!
ELISA实验中是以抗原和抗体的免疫反应为基础,ELISA试剂以及各种溶液如何配置?最近刚做了下ELISA实验,把各种ELISA配置方法汇总如下:
NaHCO3 | 1.59g |
NaHCO3 | 2.93g |
加蒸馏水至1000ml |
2、ELISA实验洗涤缓冲液(PH7.4 PBS):0.15M
KH2PO4 | 0.2g |
Na2HPO4·12H2O | 2.9g |
NaCl | 8g |
KCl | 0.2g |
Tween-20 0.05% | 0.5ml |
加蒸馏水至1000ml |
3、ELISA实验稀释液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1g
加洗涤缓冲液至100ml或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5~10%使用。
4、ELISA实验终止液(2M H2SO4):
蒸馏水178.3ml,逐滴加入浓硫酸98%、21.7ml。
5、ELISA底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4g/L) 25.7ml
0.1M 柠檬酸(19.2g/L) 24.3ml
加蒸馏水50ml
6、ELISA实验TMB(四甲基联苯胺)使用液:
TMB(10mg/5ml无水乙醇) 0.5ml
底物缓冲液(PH5.5) 10ml
0.75%H2O2 32μl
7、ELISA实验ABTS使用液:
ABTS 0.5mg
底物缓冲液(PH5.5) 1ml
3%H2O2 2μl
8、ELISA实验封闭液:
牛血清白蛋白(BSA) 5g
加洗涤缓冲液至 100ml
值得一提的是有的封闭液中含有脱脂奶粉,不适合长期保存。
为了保证ELISA实验的准确性,实验操作中加入的缓冲液和各组分一定要精确,将洗涤液加入酶标板中的时候防止加入的试剂混入另外一个酶标孔,严防交叉污染。