酶联免疫吸附测定法 (enzyme-linked immunosorbent assay),简称为ELISA,是用于检测体液中微量物质的固相免疫测定方法。它是一种特殊的试剂分析方法,是在免疫酶技术( immunoenzymatic techniques ) 的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术 。ELISA技术现在已成为目前生物医学、分析化学等领域中的常用实验方法 。
商品化ELISA试剂盒作为一种标准化、预先配置的实验室工具,用于定量或定性检测样本中的特定成分含量。这些试剂盒通常包含所有必要的组件来执行ELISA实验,在科研与工业领域均得到了广泛的使用。
商品化ELISA试剂盒有以下几点优势:
※ 标准化流程:标准化的实验步骤,减少因实验操作者不同导致的差异性。
※ 质量控制:制造商通常会对试剂盒进行质量控制,确保批间一致性。
※ 便捷性:试剂盒中包含的大部分组分都是预先配制好的,减少了实验准备时间和在准备组分中产生错误的可能性。
※ 高通量:可用于同时检测多个样本,提高实验效率。
※ 灵敏度与特异性:优化的抗体对,提供高度灵敏和特异的检测能力。
如何购买合适的ELISA试剂盒也是一门学问,如果不慎购买到不合适的ELISA试剂盒,不仅造成金钱损失,更会造成珍贵实验样本的损耗。为了避免这种问题,我们在下方为您总结了一些关于如何选取合适ELISA试剂盒的建议。
如何选取合适的ELISA试剂盒?
01 查找待测样本的蛋白浓度
ELISA试剂盒通常有其特定的检测范围,如果样本中的蛋白浓度过高或过低,可能会导致结果超出这个范围,从而无法得到准确的读数。在购买试剂盒前,可根据实验经验或相关文献资料获得参考的检测范围。比如:若待检测物浓度太低,可选择购买高敏试剂盒;若不确定待测浓度或样本间浓度差异较大,建议使用检测范围更宽的ELISA试剂盒。
02 明确待测样本的种属、样本类型
ELISA试剂盒中的抗体是针对特定物种的抗原设计的,不同物种间的抗原可能在结构上有细微差别,这会影响抗体的识别能力。实验中,需要确保抗体与样本中的抗原匹配。虽然有些抗体可能对多个物种的抗原有交叉反应,但这种反应性通常在试剂盒说明书中有所标注,并且可能不如针对特定物种的抗体敏感或特异。因此,选择与样本种属匹配的ELISA试剂盒可以避免假阳性或假阴性结果。标准曲线通常基于特定物种的已知浓度抗原构建,如果种属不匹配,可能会影响标准品的适用性和结果的解读。
不同的样本类型(如血清、血浆、细胞培养上清、尿液、组织匀浆等)可能含有不同的干扰物质,如脂肪、纤维蛋白、酶抑制剂等,这些物质可能影响ELISA的检测效果。
在选购试剂盒前,需要明确样本的种属来源(人,大鼠,小鼠等)与样本类型(血浆,组织,细胞上清等),确认选购的试剂盒能用于待测样本的检测。
03 明确试剂盒的国际质控标准
ELISA试剂盒的质控标准通常涉及到一系列的评估指标和验证过程。常见的标准如:
1. 精密度(Precision):包括板内精密度(Intra-assay Precision)和板间精密度(Inter-assay Precision)。前者反映的是同一实验板上多次重复测量的一致性,后者则是指不同实验板之间结果的一致性。精密度通常用变异系数(CV)来表示。
2. 灵敏度(Sensitivity):是指试剂盒能够检测到的最小浓度水平。灵敏度越高,试剂盒能够检测到的目标分子的浓度越低,这对于低浓度的检测非常重要。
3. 特异性(Specificity):特异性指的是试剂盒只对目标抗原作出反应,而不与其他可能存在的相似抗原或干扰物质发生反应的能力。
4. 稳定性(Stability):包括试剂盒在储存条件下的稳定性以及使用过程中的稳定性。这确保了试剂盒在有效期内能够保持其检测性能。
5. 批间一致性(Lot-to-Lot Consistency):不同批次的试剂盒应该具有相近的性能,确保实验结果的可比性和可重复性。
6. 标准曲线(Standard Curve):应该是可重复的,且具有良好的线性关系,这允许从样品读数中准确推算出目标物质的浓度。
……
相关在选购试剂盒前,需要查看或咨询厂家相关信息,确定试剂盒质量可靠、符合实验需求。
04 选择可靠的供应厂家
订购ELISA试剂盒时,选择可靠的品牌能事半功倍。选择美誉度高且可靠的ELISA试剂盒品牌时,可以遵循以下考虑因素:
※ 在选购前,可参考专业杂志、科研论坛以及社交媒体上的品牌排名和用户评价。
※ 关注厂家是否具备专利技术,这往往表明品牌在研发方面投入较多,产品质量更可靠。
※ 检查品牌的产品是否在同行评审的科学文献中有引用,这可以作为产品性能和可信度的间接证明。许多可靠品牌会主动分享其产品在科研论文中的应用案例。
※ 查看品牌是否公开透明地提供了产品的性能参数,如灵敏度、特异性、线性范围和稳定性等。
※ 查看厂商是否能够提供良好的客户服务和支持系统,包括技术支持、实验指导、退换货政策等,可以提供额外的信心和便利。
※ 了解品牌的库存状况和交货速度,特别是对于急需或常规使用的试剂盒。
通过综合考量以上因素,您可以更有把握地找到一个美誉度高、质量可靠且能满足您实验需求的ELISA试剂盒品牌。在做出决定之前,不妨联系售前服务,进一步了解产品细节和服务政策。
05 选择性价比高的产品/更省钱地购买产品
在满足其他需求的前提下,比较待选试剂盒的价格,考虑到总成本不仅包括试剂盒本身,还有可能的后续成本,如额外的实验耗材或多次重复实验的费用;在保证性能的前提下,价格适中,性价比高。如果您有定期使用某种ELISA试剂盒的需求或大量订购的需要,可以询问厂家是否有批量购买的优惠,这可能降低单位成本。
如果有特殊的实验需求,可以了解品牌是否提供定制服务,这可能在某些情况下提供更高的性价比。
此外,单价太低的试剂盒需要引起警惕,可能是部分“黑心厂家”生产的假货,如果价格显著低于市场平均价,应警惕可能的假货风险。
以上就是我们本次分享的“挑选ELISA试剂盒可以注意的事项”,你学会了吗?
关于欣博盛生物:
欣博盛生物科技有限公司成立于2007年,是一家力耕于生命科学和生物技术领域的高新技术企业,专门从事以ELISA产品为主的生物试剂研发与销售,致力于为广大研究人员提供高品质的科研产品。
欣博盛研发生产中心拥有完整的酶联免疫检测试剂盒研发和生产平台,研发生产团队由具有近30年免疫检测行业经验的专家带领,由具有生物学、医学、药学、检验学等相关专业和研发经验的人员组成。广泛与欧美知名的抗原抗体生产公司和机构开展合作,筛选和委托定制高质量的原料,采用行业内质量控制标准来研发生产ELISA试剂盒。公司自主研发的ELISA试剂盒在国内众多重点实验室广泛使用,深受广大科研人员的好评。欣博盛品牌 ELISA试剂盒自推出以来已先后在Nature, Cell, PNAS等国际期刊中被引用。
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