1、HEPG2人肝癌细胞
该细胞系来自15岁男性白人的组织。形态为上皮形,模式染色体数为55,在免疫抑制小鼠中不致瘤。
培养建议:
1、部分细胞传代后细胞内出现黑色小点,细胞间隙内出现少量颗粒物或者培养基中浮游着少量死细胞等均为正常现象,对细胞的增殖及试验无影响。可以吸去细胞悬液后用PBS进行清洗;如若PBS清洗后未能清除的碎片,可以用胰酶消化细胞重新接种,如果碎片较多,建议用PBS多清洗几遍。
2、细胞复苏或传代后会有少部分的细胞贴壁和部分悬浮的细胞,复苏两天后细胞会从贴壁细胞向外开始生长,有时细胞在生长过程中,细胞会在贴壁细胞的上方生长,形成不同的细胞层,这种情况会有发生;细胞传代处理后的第二天,在显微镜下观察细胞状态,如死细胞较多且细胞密度较低,需要进行换液操作,也可视情况稳定。
3、细胞传代后细胞有漂浮是正常现象,培养过程中会逐渐贴壁,若觉得细胞贴壁或生长较缓慢可酌情提高血清含量,总血清含量不要超过20%
4、在细胞复苏的一周内,培养瓶中通常会有悬浮的活的细胞团,在换液过程中不要丢弃在这些活的悬浮细胞,可以通过离心回收细胞,重新打回到培养瓶中,分离或者丢弃漂浮的活细胞会使细胞数量变少,引起细胞的停滞生长或细胞死亡;
5、培养条件的细微变化,尤其是pH和培养基中血清的质量,可能会影响细胞的生长状况;
6、在细胞的生长过程中会有细胞内的液泡出现,特别在细胞快要融合是会出现这种情况。
图1 BC-C-HU-024
2、LX-2人肝星形细胞
该细胞系由发表该细胞文章的第一作者命名,这个细胞又叫Lieming Xu-2,这是一个永生化的细胞。
培养建议:
1、细胞外的黑色颗粒大部分是细胞碎片,可以吸去细胞悬液后用PBS进行清洗;如若PBS清洗后未能清除的碎片,可以用胰酶消化细胞重新接种,如果碎片较多,建议用PBS多清洗几遍。
2、注意控制传代密度,低密度时细胞生长较慢。
3、细胞传代处理后的第二天,在显微镜下观察细胞状态,如死细胞较多且细胞密度较低,需要进行换液操作,也可视情况稳定。
4、细胞生长偏慢,倍增时间为48-96,注意控制传代密度,推荐传代比例1:2-1:4。
5、使用本公司BC-CE-005胰酶消化1-2min即可。
图2 BC-C-HU-055
3、Hsc-T6大鼠肝星形细胞
HSC-T6细胞是一种来源于大鼠的肝星状细胞系,被广泛用于研究肝脏生物学、肝纤维化以及相关疾病的机制。该细胞具有与原代肝星状细胞相似的特性,包括对维生素A代谢的参与。HSC-T6细胞能够摄取和酯化视黄醇,并且表达所有六种视黄酸核受体(RARalpha, -beta, -gamma和RXRalpha, -beta, -gamma),这表明它们在视黄酸代谢方面具有重要的功能。
此外,HSC-T6细胞也被用作研究肝纤维化过程中的关键细胞模型。例如,TGF-β1处理可以促进HSC-T6细胞的增殖和胶原蛋白分泌,从而加剧肝纤维化的进程。这一点通过观察到的α-SMA和COLⅠ等胶原蛋白标志物的表达增加得到了证实。
HSC-T6细胞还被用于研究细胞凋亡和自噬等细胞死亡过程。例如,油酸诱导的Sptlc2基因高表达可以促进HSC-T6细胞的凋亡和自噬。这表明HSC-T6细胞可以作为研究细胞凋亡和自噬调控机制的有效工具。
在药物筛选和治疗策略开发方面,HSC-T6细胞也显示出其价值。例如,复方861能够提高MMP3 mRNA表达水平,可能是其抗肝纤维化作用的一部分。此外,化肝煎含药血清能显著抑制HSC-T6的增殖,并对TGF-β1、CTGF及MAPK1 mRNA表达表现显著抑制作用,这可能与其抗肝纤维化的作用有关。
图3 BC-C-RA-001
肝癌细胞研究涵盖了从基础生物学特性到临床治疗方法的广泛领域。未来的研究需要进一步探索肝癌干细胞的来源、表面标志、分选方法及其在肝癌发生发展中的作用,同时深入研究免疫治疗、肿瘤微环境、纳米技术和肿瘤自噬等新兴治疗策略的应用前景和机制。此外,了解肝炎与肝癌发生的分子机制也是未来研究的重要方向之一。