（单细胞全长mRNA扩增试剂盒）Single Cell Full Length mRNA-Amplication Kit
产品名称： （单细胞全长mRNA扩增试剂盒）Single Cell Full Length mRNA-Amplication Kit
英文名称： Single Cell Full Length mRNA-Amplification Kit
产品编号： N712-01/02/03
产品价格： 0
产品产地： 江苏南京
品牌商标： Vazyme
更新时间： null
使用范围： null
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模板起始量低：单个细胞或10pg Total RNA即可作为起始模板，进行高效扩增
扩增灵敏度高：使用LNA技术及精心优化的反应体系，提高低表达基因的检出量
产物完整性好：通过双端引物扩增全长cDNA，获得全转录组信息，避免了5和3偏好性
单个293T细胞和10 pg Total RNA分别扩增18个循环，取1 μl纯化后的cDNA扩增产物使用Agilent 2100 Bioanalyzer进行检测，扩增产物分布于400-10000 bp，文库的peak位于2000 bp 左右；无模板阴性对照无产物。
Single Cell Full Length mRNA Amplification Kit能以1-500个细胞或10 pg-10 ng总RNA为模板，以Oligo(dT) VN Primer 为逆转录引物进行cDNA的合成，并且利用逆转录酶Sc Reverse Transcriptase的Template-switching活性在cDNA的3’端添加一段接头序列，通过该接头序列进行后续PCR扩增以获得全长cDNA扩增产物。有效避免了cDNA合成过程中的3’偏好性和rRNA的污染,对获得的全长cDNA扩增产物进行测序分析可以得到基因表达差异、可变剪接、融合基因等遗传调控信息。
Single Cell Full Length mRNA Amplification Kit ，兼容样品体积可控制为2.5 μl。一般情况下，一个反应可以产生2-20 ng的cDNA扩增产物。
| 组分 | N712-01 (12 rxn) | N712-02 (24 rxn) | N712-03 (96 rxn) | |
| Box 1 | 5’ TS Oligo Primer | 6 μl | 12 μl | 48 μl |
| Control Total RNA (1 μg/μl) | 5 μl | 5 μl | 10 μl | |
| Box 2 | Lysis Buffer | 230 μl | 460 μl | 2 × 920 μl |
| RNase Inhibitor | 30 μl | 60 μl | 320 μl | |
| Oligo (dT) VN Primer | 12 μl | 24 μl | 96 μl | |
| dNTP Mix | 12 μl | 24 μl | 96 μl | |
| DTT | 6 μl | 12 μl | 48 μl | |
| 1st Strand Buffer | 24 μl | 48 μl | 192 μl | |
| Sc Reverse Transcriptase | 12 μl | 24 μl | 96 μl | |
| 2 × Amplification Mix | 150 μl | 300 μl | 2 × 600 μl | |
| PCR Primer | 6 μl | 12 μl | 48 μl | |
| Elution Buffer | 1 ml | 1 ml | 2 × 1 ml | |
| Nuclease-free H2O | 1 ml | 1 ml | 2 × 1 ml |
Box 1，-70°C储存；
Box 2，-20°C储存。