2×Fast Pfu PCR MasterMix-RNAi技术-试剂-生物在线
上海沪震实业有限公司
2×Fast Pfu PCR MasterMix

2×Fast Pfu PCR MasterMix

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产品名称: 2×Fast Pfu PCR MasterMix

英文名称: 2×Fast Pfu PCR MasterMix

产品编号: HZ0043

产品价格: 0

产品产地: 中国/上海

品牌商标: 沪震生物

更新时间: 2023-08-17T10:24:20

使用范围: null

上海沪震实业有限公司
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 2×Fast Pfu PCR MasterMix

中文名称:2×Fast Pfu PCR MasterMix
英文名称:
产品规格:1ml
本制品是将PCR反应所需的Fast Pfu酶、dNTP、MgCl2、反应缓冲液以及优化剂以及稳定剂,预先配制成2倍浓度的混合物。2×Fast Pfu PCR MasterMix专为扩增克隆DN**段优化,高保真,错误率仅为1.3x10-6。使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,非常方便。较普通Pfu酶,2×Fast Pfu PCR MasterMix具有快速、高灵敏度、抗干扰能力强等特点,能获得更理想的扩增结果,并大幅度缩短扩增反应时间。
本制品用于要求保真度比较高的PCR反应,包括克隆PCR、DN**段拼接、引入突变、全基因合成等。

产品特点
高保真:具有同Pfu酶相同的保真度,为普通Taq酶的10倍。
快速:Fast Pfu扩增速度为普通Pfu酶的数倍,72℃保温30秒可延伸1kb以上。
灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段
快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。
便利:10μl,25μl或50μl体系全部适用。

使用建议
Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端,无3′端"A"突出,其PCR产物的克隆有两种方案:
1、PCR前引物进行5′端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中。
2、将产物3′末端加A后再与T载体连接。
由于Fast Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3′端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度,理想的引物长度为20-30bp 碱基。另外为了减少由3′- 5′外切酶活性引起的引物降解,尽量在冰上配制反应体系。

常用反应体系(50μl):

组分 体积
2×PCR MasterMix* 25μl
上游引物 0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物 0.2-1.0μM(终浓度)
dNTP(各10mM) 1.0μl
模板 1-50ng(质粒)
10ng-1μg(基因组)
ddH2O 至50μl
*Mg2+终浓度为2mM



常用PCR循环

当扩增片段<3K:
94℃ 1分钟30秒
30次循环 94℃,30秒
57℃,30秒
72℃ 根据产物长度调整, 30秒/kb
72℃ 5分钟
4℃ 保温
当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp):
94℃ 1分钟30秒
30次循环 94℃,5秒
68℃ 根据产物长度调整,30秒/kb
72℃ 5分钟
4℃ 保温

PCR MasterMix选购指南:

编号

产品名称

特点

适用于菌落鉴定、菌液鉴定及常规PCR鉴定实验的Mix系列

HZ0030

2×Taq PCR MasterMix

高性价比PCR Mix,使用简便,扩增灵敏度高

HZ0034

2×Complex Taq PCR MasterMix

HZ0030改进版,性能更均衡,适用面更广

HZ0040

2×Fast Taq PCR MasterMix

最快速的PCR试剂,常规PCR鉴定45分钟内知道结果

HZ0035

2×RoomTop Taq PCR MasterMix

可放在手边的PCR试剂,室温稳定存放60

HZ0036

2×RoomTop Fast Taq PCR MasterMix

室温稳定存放60天,高速PCR试剂,常规PCR鉴定45分钟内知道结果

适用于一些较难扩增的PCR条带的鉴定及短片段克隆

HZ0032

2×Taq Plus PCR MasterMix

扩增效率更高及较好的保真度

HZ0038

2×Hot Start Taq PCR MasterMix

采用热启动Taq,可获得很好的特异性

HZ0041

2×Ultra Taq PCR MasterMix

高速扩增酶,优化配方,解决PCR扩增难题的,灵敏度高

高保真酶试剂,适用于长片段基因克隆

HZ0031

2×Pfu PCR MasterMix

采用高保真酶,适用于基因克隆

HZ0043

2×Fast Pfu PCR MasterMix

采用改良型高保真酶,更好的扩增效果,4倍扩增速度;扩增迅速

防止PCR产物二次污染、极高检测灵敏度的PCR试剂

HZ0047

2×PCR MasterMix(防污染)

采用dUTP/UDG酶系统,从根本上杜绝PCR产物二次污染

HZ0033

2×Genotyping PCR Kitnomal

极高检测灵敏度,可达到普通PCR试剂102104倍扩增灵敏度



PCR MasterMix
性能对比表:

名称

编号

扩增时间

扩增长度

是否有3-A

基因组扩增

2×Taq PCR MasterMix

HZ0030

1min/kb

≤8kb

+

2×RoomTop Taq PCR MasterMix

HZ0035

1min/kb

≤8kb

++

2×Complex Taq PCR MasterMix

HZ0034

1min/kb

≤8kb

+

2×Fast Taq PCR MasterMix

HZ0040

15s/kb

≤8kb

+

2×RoomTop Fast Taq PCR MasterMix

HZ0036

15s/kb

≤8kb

++

2×Ultra Taq PCR MasterMix

HZ0041

15s/kb

≤8kb

+++

2×Taq Plus PCR MasterMix

HZ0032

1min/kb

≤20kb

++++

2×Ultra Taq Plus PCR MasterMix

HZ0042

15s/kb

≤30kb

++++

2×Hot Start Taq PCR MasterMix

HZ0038

1min/kb

≤8kb

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