慢病毒，腺病毒，RNAi/基因过表达服务

慢病毒包装

威斯腾生物（Western Biotechnology）专业实验平台是目前较为先进，实验技术齐全的平台和国内外多家知名研究院所合作，为国内6000多家客户提供专业技术服务。威斯腾生物平台的慢病毒技术是国内做得最早，质量最稳定的产品，专业技术团队，标准化生产流程，严格的质量把控，本平台为您提供慢病毒载体构建，慢病毒包装以及基于慢病毒技术的稳定细胞系构建，后续功能验证的体外和体内实验等相关服务。

慢病毒（Lentivirus）具有感染谱广泛，可以有效感染分裂期和静止期细胞，长期稳定表达外源基因等优点，因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达，RNA干扰，microRNA研究以及活体动物实验中。

慢病毒载体系统为4质粒系统，包括pRsv-REV、pMDlg-pRRE、pMD2G和目的穿梭质粒。其中穿梭质粒（目的穿梭质粒）含有eGFP（能表达绿色荧光蛋白），pRsv-REV、pMDlg-pRRE、pMD2G含有病毒包装所必须的元件。

慢病毒载体的优越性:

基于HIV的慢病毒载体（Lentiviral Vector）能有效地感染分裂细胞和非分裂细胞，比传统的逆转录病毒载体应用范围广。与脂质体转染相比，慢病毒感染具有更高的效率； 能高效地将目的基因转导入体内和体外培养的细胞中去；能够稳定地长期地表达目的基因，优于腺腺病毒载体；由于更换了膜蛋白（VSVG），宿主范围相当广泛。通过合理设计极大的加强了其安全性，没有产生复制型慢病毒的可能性，安全性考来自其整合特性。

【服务项目】

一、慢病毒载体构建服务

1.1  Western Biotechnology可为您构建包括eGFP、RFP、puromycin、neomycin等各种标签的慢病毒基因过表达载体和RNA干扰载体，可以为客户的实验设计提

供丰富的选择方案。

1.2 本平台还可以根据客户需要对载体的启动子和表达框进行改造，实现组织特

异性或调控表达的特殊需要。

二、RNAi慢病毒系列服务

2.1 siRNA化学合成。

2.2重组慢病毒shRNA慢病毒质粒构建。

2.3定制shRNA慢病毒构建与包装服务(已知有效靶序列)。

客户需提供已通过文献查询或实验证明的有效靶点序列信息的 shRNA的序列.我们按照客户要求完成shRNA慢病毒产品的制备，可以提供慢病毒shRNA质粒和shRNA慢病毒产品等。

定制RNAi慢病毒产品可直接用于细胞系，原代细胞，干细胞，动物组织等的感染，表达shRNA。

* Easy shRNA慢病毒构建与包装服务

腺病毒包装

腺病毒(adenovirus)是一种没有包膜的直径为70～90 nm的颗粒，由252个壳粒呈廿面体排列构成。每个壳粒的直径为7～9 nm。衣壳里是线状双链DNA分子，约含35 000 bp，两端各有长约100 bp的反向重复序列。由于每条DNA链的5，端同相对分子质量为55X103Da的蛋白质分子共价结合，可以出现双链DNA的环状结构。人体腺病毒已知有33种，分别命名为adl～ad33，研究得最详细是ad2。腺病毒基因组转录产生mRNA，已知的转录单位至少有5个：正Ⅰ区位于病毒基因组左侧，可再分成正ⅠA和正ⅠB，与细胞转化有关；正Ⅱ区编码DNA结合蛋白，参与病毒的复制；正Ⅲ区编码出现在宿主细胞表面的一种糖蛋白；正Ⅳ区位于ad2基因组右端，受正Ⅱ区编码的DNA结合蛋白质调控；第5个转录单位在病毒感染中期合成ad2蛋白质Ⅳ。 
腺病毒特性：
威斯腾生物腺病毒表达系统是以Ad5血清型E1/E3缺陷型腺病毒DNA为骨架，在克隆、包装、扩增等各部分条件做了改进和优化，达到了克隆阳性率更高、质量更可靠、包装稳定、出毒迅速、滴度高等效果。在此基础上，提供各种带有不同报告基因、不同标签的重组腺病毒载体服务。同时我们还可以根据客户需要完成各种较高难度的载体构建，如双基因载体构建，具有细胞毒性作用基因的腺病毒载体构建等。所得到的毒液可以用于信号转导、基因转位、Co-IP、动物实验、干细胞研究等科研实验。
我们的服务：
（1）表达目的基因的重组腺病毒载体构建服务（最大插入片段5kb）
（2）超大量及超高滴度的重组腺病毒扩增和纯化服务
（3）重组腺病毒载体的鉴定
（4）shRNA基因沉默效应验证
（5）表达shRNA的重组腺病毒载体的构建服务
（6）构建各种带不同标签和不同报告基因的腺病毒载体
（7）可调控表达的重组腺病毒载体
（8）目的基因的克隆，或者定购
（9）质量控制
服务承诺
（1）我们承诺从得到cDNA到完成纯化的服务时间将在70个工作日内完成
（2）我们承诺所提供的病毒毒液的滴度在1011PFU/ml以上（纯化后），总量不少于1012 PFU/ml
（3） 所提供的毒液量：2～3ml
（4） 可以包装任何有细胞毒性作用的基因；保证100%的包装成功率

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