不含有DMSO和血清的安全有效地细胞冻存液
New CryoScarless DMSO-Free

完全不含具有高毒性冷冻保护剂（DMSO）和血清的新型细胞冻存液。能够进一步提高细胞冻存效果。

【特 征】

• 低毒性：完全不含DMSO；
• 安全性：完全不含血清等动物蛋白质；
• 可在低温冰箱（-80℃）长期冻存细胞；
• 无需程序化降温，细胞冻存操作简便；
• 细胞存活率可达90%以上；
• 能在保持部分干细胞分化潜能的状态下冻存。

【使用方法】

■细胞冻存：

1. 收集对数生长期细胞制成细胞悬液。
2. 4-10℃离心弃上清，保留细胞沉淀，加入CryoScarless DMSO-Free重悬细胞，最适浓度为5 × 105 - 106细胞/mL。
3. 将细胞悬液分装至冻存管中，于- 80℃的低温冰箱中冻存。
   

■细胞复苏：

1. 将冻存管取出迅速并置于37℃ 恒温水槽中轻轻摇晃使其快速解冻。（注意：浸入时不可触碰冻存管盖）
2. 使用细胞培养或实验用的培养基（10ml左右）离心清洗。

【案例】

大鼠骨髓间充质干细胞（RMSCs）的冻存

 

大鼠RMSCs冻存分化潜能的比较

各种细胞的CryoScarless DMSO-Free冻存效果

冻存细胞	复苏24h细胞存活率/%
L929（小鼠成纤维细胞）	97.5 ± 1.2
MG63（人骨肉瘤细胞）	93.1 ± 2.3
HT1080（人成纤维肉瘤细胞）	90.2 ± 4.3
Colon26（小鼠结肠癌细胞）	92.3 ± 2.3
B16F1（小鼠黑色素瘤细胞）	94.2 ± 0.6
KB（人口腔癌细胞）	91.8 ± 0.9
Caco2（人结肠癌细胞）	93.7 ± 1.9
MC3T3（小鼠胚胎成骨细胞）	94.4 ± 0.5
Jurkat E6-1（人白血病细胞）	88.4 ± 2.5
HUVEC（人脐带静脉内皮细胞）	89.9 ± 0.4
HCAEC（人冠状动脉内皮细胞）	90.1 ± 1.6
MEF（小鼠胚胎成纤维细胞）	94.4 ± 0.8
hACh（人软骨细胞）	93.5 ± 0.7

图表中经由CryoScarless DMSO-Free 冻存的各种动物细胞存活率约为90%，由此表明CryoScarless DMSO-Free适用于多种细胞的冻存。

Tissue Keep 细胞、组织保存液

Tissue Keep系列是用于保存实验室的细胞、组织的保存液套装。
通过绿茶多酚的主要成分表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）的保护作用，使细胞、组织的鲜度、形态、生理活性不受损进而起到长期保存的效
果。
*（EGCG）被称为绿茶益多酚，被认为是绿茶中最有效的抗氧化多酚。此EGCG被认为具有抑制细胞增殖、保护细胞的作用。

【Tissue Keep系列的特征】

• 可在以往基础上提高细胞、组织的鲜度、形态、生理活性并进行保存。
• 保存后，可用常规的培养基清洗细胞、组织从而去除保存液后用于实验。
• 根据用途备有3种基础培养基。

套装内容：
Tissue Keep基础培养基……基础培养基20mlx1瓶
保存剂（EGCG）……1颗
*①请务必于使用前再加入，②溶解后使用。③Cryo Scarless已溶解于保存剂内。

■Thelio Keep

可用于冷藏保存薄而易损的上皮、内皮组织，能持续保存1-2周。

【特征、用途】

• 可冷藏保存（4-10℃）角膜、软骨、血管等薄而易损的组织1-2周。
• 可保持细胞原有的形态，提高并维持鲜度、细胞存活率、生理活性等。
• 保存后，可用常规的培养基清洗组织从而去除保存液。
• 不仅仅局限于小鼠、大鼠，还可用于更广范围的哺乳类动物的多种上皮、内皮组织的保存。

将人角膜内皮组织分别放入Thelio Keep和其他产品保存液内保存，进行2周4℃保存后，通过电子扫描显微镜观察标本形态，保存于Thelio Keep内的组织形态（图1）明显好于由其他产品保存液保存的组织形态 （图2） 。图1显示，由Thelio Keep保存的组织，维持了六角形的细胞膜形态，而图2由其他产品保存液保存的组织的细胞膜原型已完全消失。

■Neuro Keep

可用于冷藏保存末梢神经等神经组织，能持续保存1-2周。

【特征、用途】

• 可冷藏保存（4-10℃）神经组织1-2周。
• 可在以往的基础上提高并保持生理活性进行保存。
• 保存后，可用常规的培养基清洗组织从而去除保存液。
• 不仅仅局限于小鼠、大鼠，还可用于更广范围的哺乳类动物的多种神经组织的保存。

将大鼠末梢神经束放入Neuro Keep或者其他产品保存液内，进行2周4℃保存后，通过电子扫描显微镜观察标本的断面形态，由Neuro Keep保存的组织形态（图2）明显好于由其他产品保存液保存的组织形态（图3）。图2显示的组织形态和图1新鲜的组织形态相比也丝毫不逊色。Neuro Keep保存的断面形态正常，由其他产品保存液保存的组织的的断面形态已经萎缩。

■Cryo Scarless

可用于冷冻保存细胞、组织。

【特征、用途】

• 保护细胞膜，防止因冷冻、解冻而损伤细胞、组织。
• 与以往产品的相比，进一步提高并保持生理活性。
• 保存后，进行细胞、组织的解冻，可用常规的培养基清洗组织从而去除保存液。

大鼠胰腺组织通过Cryo Scarless或其他公司产品进行冷冻，然后通过常规方法解冻。通过实体显微镜比较形态。
通过Cryo Scarless冷冻保存的组织形态（图1）明显好于由其他产品冷冻保存的组织形态（图2），且胰岛形态维持原样。

细胞	月	存活率%
L929	12	95%
Colon26	6	95%
Svo1	6	95%
Pia islets	3	85%
B16 melanoma	6	95%
MC3T3E1	6	95%
Mouse Ivmphocvte	6	95%
Caco2	6	95%
Mg63	6	95%
Rat vascular smooth muscle cells	6	90%