一、细胞基本属性
细胞名称 HGECs人牙龈上皮细胞永生化
细胞别称 HGECs；人牙龈上皮细胞永生化
种属来源 人
组织来源 牙龈
生长特性 贴壁生长 
细胞形态 上皮细胞样
细胞代数 10代以内
细胞规格 1x106cells/T25或1mL冻存管
支原体检测 无
培养基 HGECs牙龈上皮细胞永生化专用培养基
培养条件 气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件 无血清冻存液，液氮储存
供应限制 仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
细胞货期 现货，1周左右
运输方式 复苏发货（T25瓶免运输费用）/  冻存发货（需加干冰运输费用） 顺丰快递
供应限制 仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明 以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主　　
  二、细胞培养操作
收货方式 T25瓶 冻存管
收货处理 观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状态 收到细胞后，需立即转入液氮冻存或直接复苏
传代密度 细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养 第三天换液并检查细胞密度
传代比例 首次传代建议1：2传代，1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿 一管细胞建议接种到6cm培养皿或者T25瓶
传代方法 
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗HGECs细胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.05%Trypsin-0.02% EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min（视细胞消化情况而定），然后在显微镜下观察HGECs细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
将含有1 mLHGECs细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有HGECs细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL完全培养基，培养过夜）。第三天换液并检查细胞密度。
注意事项 
1.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养HGECs细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 
2.因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。
1.收货时若发现干冰化完，检查冻存管是否融化，若已融化需直接离心细胞接种观察，若未融化可以将细胞按正常步骤保存；
2.为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻复苏细胞。
到货须知 
1.收到HGECs细胞后，首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照（当天以及第 2,3 天请拍照），记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据)；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
3.由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。
备注：客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以拨打技术服务电话：400-080-3389 按 2，我们随时给予解答。
  三、细胞冻存操作
冻存液配方 无血清冻存液，液氮储存
细胞密度 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例
冻存方法 a、收集HGECs细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，加 1 mL血清重悬细胞，进行HGECs细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x106~1x107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案
  四、售后服务
重发标准 
1.细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；
2.收到细胞未开封，如出现污染状?，重发；
3.收到细胞3天内，发现污染问题，经核实后，重发；
4.常温发货的细胞静置 2 小时后，干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后，绝大多数细胞未存活，经核实后，重发；
5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后，出现污染，经核实后，重发；
6.细胞活性问题，请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，经核实后，重发；
7.视具体情况而定。
不予重发 
1.客户操作造成细胞污染，不重发；
2.客户严重操作失误致细胞状态不好，不重发；
3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
4.细胞状态不好，未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片，不重发；
5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的，不重发；
6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的，不重发；
7.视具体情况而定。