大片段Bst DNA聚合酶

中文名称：大片段Bst DNA聚合酶
英文名称：Bst DNA Polymerase，Large Fragment
产品规格：800U|800U×5
大片段Bst DNA聚合酶是Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的一部分，来源于E.coli菌株。利用基因重组技术，在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。该酶具有5′→3′DNA聚合酶活性，但不具有5′→3′外切核酸酶活性。本制品可应用于DNA测序、DNA标记和等温DNA扩增等。

产品特点：
1．链置换活性强。
2．高灵敏度。
3．最佳活性温度为65℃，恒温扩增，无需热循环仪。

产品用途：
1．富含GC序列的DNA序列测定；
2．微量（纳克量）DNA模板的快速测序；
3．随机引物DNA标记；
4．双链DNA 5突出端补平法标记；
5．可用于等温DNA扩增，如环介导等温扩增（LAMP），全基因组扩增（WGA），解旋酶恒温基因扩增（HDA）等。

产品组成：

保存条件：-20℃

反应实例：

Bst DNA聚合酶大片段用于LAMP实验，以M13 ssDNA为模板，以F3/B3，FIP/BIP为引物，65℃反应1小时后，进行琼脂糖凝胶电泳检测。
泳道M：1kb DNA Ladder；
泳道1：LAMP扩增产物。

质量保证：
经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带，qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

活性定义：
65℃条件下，30分钟内使10nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。

10×反应缓冲液：
200mM Tris-HCl，100mM (NH4)2SO4，500mM KCl，20mM MgSO4，1% Tween 20，pH8.8。

贮存液：
50mM KCl，10mM Tris-HCl (pH7.5)，1mM DTT,0.1mM EDTA，0.1% Triton X-100和50% Glycerol。

反应条件：1×反应缓冲液，65℃温浴。

热失活：80℃，10分钟

注意事项：
1．Bst DNA聚合酶不具有3′→5′外切酶活性；
2．长期贮存需加入100μg/ml BSA或0.1% Triton X-100；
3．建议反应温度不要超过70℃；
4．Bst DNA聚合酶不能用于热循环测序或PCR。 

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！