miRNA靶基因报告载体
产品名称: miRNA靶基因报告载体
英文名称: miRNA Target Luciferase Reporter Vectors
产品编号: LR-00xx
产品价格: 0
产品产地: 美国
品牌商标: Signosis
更新时间: null
使用范围: null
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许多重要的调节基因受miRNA调控,如Ers受let-7调控,Bcl-2受miR-15和miR-16调控,TPM1受miR-21调控。Signosis开发的miRNA靶基因荧光素酶报告载体可用于研究miRNA是否对靶基因存在调控作用。在荧光素酶报告基因下游插入靶基因3’ UTR区域,通过对荧光素酶报告基因表达的检测,即可研究体内miRNA对靶基因的调控作用。
A. 产品优势
功能性检测——一种功能性的分析方法,用于检测体内miRNA对靶基因的调控作用;
可定量分析——miRNA介导的调控可以通过荧光素酶报告基因的表达进行定量检测;
可构建稳定细胞系——载体可用于构建表达报告基因的稳定细胞系。
B. 技术原理
miRNA与位于荧光素酶RNA下游的靶基因3 UTR结合,抑制荧光素酶表达,使酶活性下降。通过比较两个样本的荧光素酶活性,可研究miRNA对靶基因的调控作用。
C. 载体结构图
D. 结果展示
实验组使用的质粒是pLu-Ets1-3UTR,该质粒在pLuc载体荧光素酶报告基因3端插入包含miR-200b靶位点的Ets-1 3端UTR序列;对照组使用空pLuc载体。图中空心柱和实心柱分别表示对照以及miR-200b转染细胞后的结果。
E. 产品应用实例
1) ANT2 suppression by shRNA restores miR-636 expression, thereby downregulating Ras and inhibiting tumorigenesis of hepatocellular carcinoma. Jang JY, Lee YS, Jeon YK, Lee K, Jang JJ, Kim CW. Exp Mol Med. 2013 Jan;45:e3.
2) IL-1 Receptor Regulates microRNA-135b Expression in a Negative Feedback Mechanism during Cigarette Smoke–Induced Inflammation. Halappanavar S, Nikota J, Wu D, Williams A, Yauk C Stampfli M. J Immunol., 2013;190(7):3679-86.
Suppression of Induced microRNA-15b Prevents Rapid Loss of Cardiac Function in a Dicer Depleted Model of Cardiac Dysfunction. Roy S, Banerjee J, Gnyawali S, Khanna S, He G, Pfeiffer D, Zweier J, Sen C. PLoS One., 2013 Jun;8(6):e66789.