蛋白提取液(Western)

中文名称：蛋白提取液(Western)
英文名称：
产品规格：50ml|100ml
蛋白提取液对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用，是经典常用的细胞组织快速裂解液。蛋白提取液得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。蛋白提取液中已含常用磷酸酶抑制剂。

储存条件：提取液室温保存。抑制剂-20℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
1．实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。
2．整个过程须保持样品处于低温状态。

使用方法：
A．细胞裂解
1．裂解液制备：每 1ml蛋白提取液中加入2μl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2．取5-10×106个细胞，在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
3．用冷 PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4．每 5×106个细胞中加入500μl冷的裂解液(每106个细胞加100μl蛋白提取液。
大约相当于6孔板的每孔加入100μl～150μl，或一个75 cm2培养瓶加1～2ml。裂解液和细胞应充分接触。如果蛋白提取液不足量，细胞裂解效率将会降低)，混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。
5.在 4℃，14000rpm条件下离心15分钟。
6．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
B．组织裂解
1．裂解液制备：每1ml蛋白提取液加入2μl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2．取100mg组织样本剪碎，加入1ml裂解液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
3．将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm条件下离心5分钟。
4．将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。 

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！