蛋白双向电泳/原核蛋白表达/真核蛋白表达

蛋白双向电泳

随着后基因组时代的到来，蛋白质组学得到了空前的发展，蛋白质组研究旨在揭示基因表达的真正执行生命活动的全部蛋白质的表达规律和生物功能。包括蛋白质组、蛋白质组学、功能蛋白质组学和结构基因组学等新的概念的提出，蛋白质组学已成为当今生物领域中极其活跃的学科。（Two Dimensional Electrophoresis ，2DE) 是蛋白质组研究的三大关键核心技术之一。双向电泳由于具有高分辨率和高灵敏度已成为分析复杂蛋白混合物的基本工具。

原理：

2DE 的第一向电泳是等电聚焦电泳(Iso-Electric Focusing ，IEF) ，然后通过十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) 对蛋白质进行第二向电泳；在IEF 中，蛋白质因等电点不同而被分离，在SDS-PAGE 中，不同分子量的蛋白质相互间被分离开，再用考马斯亮兰或银染进行检测，经Pdquest 等软件对结果进行比对、解析。

蛋白双向电泳相关说明：

1.本表所列的样品指可用常规方法处理的样品，如样品较特殊（富含核酸，盐分，脂类，色素，多糖等影响双向电泳而需去除的的杂质或需浓缩样品），价格将视进一步处理的方法，根据相应费用另行商定。 

2.为了达到好的实验效果，客户所送样品，都要经过我们的样品制备和双向电泳预实验，以确保客户项目能顺利进行。

3.用于一次制备型（考马斯亮蓝染色，用于后续质谱分析）双向电泳的样品，动物组织、细胞或细菌的样品量湿重不少于100mg；植物或真菌样品量湿重不少于2g；富含杂质或蛋白质含量低的样品量湿重不少于3g；如直接提供蛋白质提取物，浓度不少于4mg/ml，总量不少于5mg。

蛋白质表达与纯化

随着蛋白药物市场的快速发展和蛋白质组学研究的深入，高纯度活性蛋白的需求越来越大。威斯腾生物中心组建了一支由多名具深厚生物技术基础与制药企业工作经验的留学归国人员和国内专家为核心的团队。可为国内外客户提供从基因到蛋白纯化的整套技术服务。

威斯腾服务特色

稳定而多样的表达系统：威斯腾生物已建立整套的基因克隆与表达体系，无论是单个基因的克隆、表达与纯化，还是多个基因高通量的基因克隆、表达和纯化，均能选用适合您试验（科研项目）需要的表达系统和合适的表达载体为您提供优质的服务。

多种纯化方式：可为客户提供多种蛋白纯化服务，纯化方式包括亲和层析纯化、凝胶过滤、离子交换、疏水层析等，客户可根据需要选择合适的纯化方式。

专业的团队和良好的信息管理体系：专业的基因克隆、蛋白表达与纯化技术人员与团队，具有丰富的表达和纯化经验，可为客户解决各种瓶颈问题, 良好信息管理体系使我们能够为客户提供成熟、高效的基因克隆服务。

操作流程

大肠杆菌和酵母蛋白表达系统：

合成基因（另外收费）或者客户提供

SDS-PAGE检测表达

Western blot检测表达（可选）模板(cDNA、基因组DNA、质粒等)

构建表达载体

筛选阳性克隆

表达优化和可溶性分析

提供结果

１、构建的表达载体及测序报告

２、SDS-PAGE结果

３、筛选的表达菌株

４、Western blot结果

５、实验流程及结果

６、2ml 1.0×108pfu/ml的病毒（利用昆虫杆状病毒蛋白表达系统表达时）

稳定表达细胞株（哺乳动物细胞）

威斯腾实验服务流程

威斯腾生物服务项目