VAHTS Serum/Plasma Circulating DNA Kit(针对血清/血浆样本中短片段游离DNA富集定向优化的DNA提取试剂盒)
产品名称: VAHTS Serum/Plasma Circulating DNA Kit(针对血清/血浆样本中短片段游离DNA富集定向优化的DNA提取试剂盒)
英文名称: VAHTS Serum/Plasma Circulating DNA Kit
产品编号: N902-01/02
产品价格: 0
产品产地: 南京
品牌商标: Vazyme
更新时间: null
使用范围: null
- 联系人 :
- 地址 : 南京市经济技术开发区红枫科技园C2栋
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- 邮箱 : wangminwen@vazyme.com
适用于短片段cfDNA提取
提取纯度高,产量高,产物浓度测定准确
提取cfDNA覆盖度好,无偏好性,适于二代测序用建库实验
兼容手动提取及自动提取程序
1.适用于短片段cfDNA提取
人cfDNA为平均长度180 bp的短片段DNA,因此对较小的DN**段回收率是评价cfDNA提取效率的关键因素。使用VATHS®磁珠法血浆游离DNA提取试剂盒中的磁珠提取DNA ladder(70-1000 bp区间),与原始DNA以相同稀释倍数经Agilent 2100 DNA1000芯片检测如右图所示,提取后的DNA与投入DNA重合度高,基本无DN**段大小偏好性。
2.提取纯度高
使用VAHTS®磁珠法血浆游离DNA提取试剂盒提取血浆cfDNA,经Agilent 2100高敏芯片检测,线条平滑,cfDNA峰型饱满,其它位置无杂峰,显示提取的cfDNA纯度高,杂质少。使用提取的cfDNA进行用于二代测序的建库实验,建库产量高,无杂峰,更适用于二代测序检测。
3.提取产量高
与进口柱纯化游离DNA提取kit(Q)和国产柱纯化游离DNA提取kit(T)提取同一血浆样本的游离DNA,经Qubit试剂盒(Thermo Fisher)测定浓度,VAHTS 磁珠提取产量少于Q及T柱纯化产物,但经qPCR检测血浆中掺入的痕量短片段外源DNA相对投入量的比例,VAHTS®磁珠提取的产量是Q柱纯化的1.5倍左右,T柱纯化的3倍以上,说明受Carrier RNA影响,通过Qubit测定的浓度不能反映实际cfDNA浓度,VAHTS®磁珠法提取试剂盒实际提取效率高于传统柱纯化方式。
4.提取DNA浓度精确
传统柱纯化法受到Carrier RNA加入的影响,测定浓度时比实际值偏大,影响后续操作判断。VAHTS®磁珠法提取的cfDNA浓度准确,用Qubit试剂盒定量及用KAPA gDNA绝对定量试剂盒(KAPA hgDNA Quantification and QC Kit)做QPCR的定量结果吻合度高。
5.兼容手动提取及自动提取程序
手动提取最大样本量可达16样/次,操作时间<2小时/次。由于磁珠法无需离心换管等操作,因此同样可适用于目前主流的自动核酸提取仪如KingFisher Flex Smart32游离DNA提取仪,可针对不同样品量及样品来源设定不同处理程度,简单、快速的进行大规模提取,大大降低实验者的工作量和实验中的人为误差,保证结果的稳定性和均一性。
6.cfDNA构建文库覆盖度好,无GC偏好性
使用VAHTS磁珠法血浆游离DNA提取试剂盒提取cfDNA,1ng投入建库进行测序分析。测序平台为X-Ten,cfDNA PCR文库测序数据显示GC含量正常,没有偏好性;Q30在90%以上,说明测序数据质量较好;因cfDNA属于高度片段化状态,覆盖度在60-70%,属于正常范围;dup rate普遍较高,和测序平台有关;数据显示几乎没有接头残留。
VAHTS® Serum/Plasma Circulating DNA Kit为基于超顺磁性的磁珠纯化技术,针对血清/血浆样本中短片段游离DNA富集定向优化的DNA提取试剂盒。超顺磁性氧化硅纳米磁珠具有分散度高、表面积大、吸附特异性好等特点,高效结合并富集DN**段。
本试剂盒应用于从较灵活起始范围(200 μl~2 ml)的血清、血浆样品中提取高质量游离DNA,操作简单、快速,全程无有毒有机溶剂。针对低分子量核酸定向优化,具有DNA提取无偏好性、提取产量高、核酸纯度高、重复性强等优点。得到的DNA可直接用于定量PCR和二代测序等实验。兼容手动提取和自动提取流程,同时兼容无游离醛基的cfDNA采血管如Streck Cell-Free DNA BCT或VAHTS®游离DNA保存用采血管或普通EDTA采血管得到的血浆样本。
组分 | N902-01 (50 rxns) | N902-02 (200 rxns) | |
Box1 | VAHTS® Particles G | 2 ml | 8 ml |
Proteinase K | 35 mg | 4 × 35 mg | |
Protease Dissolve Buffer | 2.5 ml | 8 ml | |
Box2 | Buffer SDS | 6 ml | 20 ml |
Buffer B | 45 ml | 160 ml | |
Buffer W1 | 40 ml | 120 ml | |
Buffer W2 | 25 ml | 2 × 40 ml | |
Elution Buffer | 10 ml | 20 ml |
Box1,2-8℃保存;溶解后的 Proteinase K须保存于-20℃。
Box2,室温保存。