invitrogen脂质体2000转染试剂lipo2000转染试剂11668-019
Lipofectamine® 2000 Transfection Reagent
 

 
使用Lipofectamine™2000转染Stealth™RNA或者进入哺乳动物细胞时，遵从以下一般性指导：
1为了获得最佳基因阻断结果，每一种细胞系转染Stealth™RNA或者siRNA的量都需要经过实验确定。如果您是首次转染您的细胞系，推荐尝试使用几个Lipofectamine™2000的浓度，并在20-100nM范围内改变Stealth™RNA或者siRNA的浓度，以确定达到最佳基因阻断水平所需要的条件。高浓度的Stealth™RNA或者siRNA可能具有细胞系依赖性。注：我们推荐开始时使用40nM Stealth™RNA或者。
2 在30-50％细胞汇合度时进行转染。通常基因阻断的分析至少要在转染后24-72小时进行。低密度转染细胞可以使转染和分析之间更长的间隙更长，从而使由于细胞过度生长造成的细胞活性损害减少到最低。根据靶基因的特性，高密度转染的细胞可能更加适合条件的优化。
3 不要在转染时的培养基中加入抗生素，因为这将会降低细胞转染的效率和导致细胞死亡。
4 为了获得更好的结果，可以使用Opti-MEM® I 低血清培养基（目录号31958-062）在形成复合物前稀释Lipofectamine™2000和Stealth™RNA或者寡聚物。
5 可以使用invitrogen BLOCK-iT™荧光寡聚物(BLOCK-iT™　Fluorescent Oligo)(目录号　2013)帮助优化细胞系的转染条件。一旦确定了用来转染的最佳条件，在每一次实验都包括BLOCK-iT™荧光寡聚物，作为转染效率的指示剂。如果需要的更多的信息，请参阅BLOCK-iT™荧光寡聚物说明书，说明书可以通过我们的网站下载或者通过拨打技术服务热线。贮存在+4°C。脂质体Lipofectamine™2000试剂保证6个月稳定，妥善贮存。
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