Discover-sc® WTA Kit V2

单细胞转录组测序文库构建最佳搭档

模板起始量低：单个细胞或10pg Total RNA即可作为起始模板，进行高效扩增

扩增灵敏度高：使用LNA技术及精心优化的反应体系，大幅度增加了低表达基因的检出量

产物完整性好：通过双端引物扩增全长cDNA，获得全转录组信息，避免了5和3偏好性

操作成功率大：大大减少了RNA样品的处理，从而最大限度避免了样品损失的风险，提高了操作成功率

体积兼容性广：样品兼容体积可高达5 μl，兼容不同浓度的模板进行扩增 

1.模板起始量低，扩增产物cDNA完整性好

10 pg 293T细胞Total RNA用Discover-sc® WTA Kit V2进行扩增，取1 μl cDNA扩增产物用Agilent 2100 Bioanalyzer进行分析。试剂盒以Oligo dT Primer为逆转录引物，并利用Discover-sc® Reverse Transcriptase的Template-switching活性在cDNA的3’端添加一段接头序列，通过该接头序列进行后续的PCR扩增，获得全长cDNA扩增产物，同时避免了rRNA的污染。

2.文库质量分析—数据基本指标

Vazyme-1和Vazyme-2是单个293T细胞经过Discover-sc® WTA Kit V2 进行扩增，C-1和C-2是单个293T细胞经过用C公司单细胞转录组试剂盒进行扩增，取1 ng cDNA扩增产物经TruePrep® DNA Library Prep Kit V2 for Illumina构建文库。以下均为此文库数据分析。

3.基因表达总体情况分析

Discover-sc® WTA Kit V2试剂盒扩增产物检测灵敏度高，单个293T细胞检测到基因数高达15000个。

4.数据分布均一，无偏好性

左图为Vazyme-1测序片段在基因上的分布结果，右图为C-1测序片段在基因上的分布结果，数据显示Discover-sc® WTA Kit V2扩增很好的保证了基因5’和3’的覆盖。

5.表达重复相关性高

左图为Vazyme-1和Vazyme-2表达重复相关性分析，右图为C-1和C-2表达重复性相关性分析。数据结果表明表达重复相关性高于C公司。