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细胞裂解液(用于反转录)

细胞裂解液(用于反转录)

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产品名称: 细胞裂解液(用于反转录)

英文名称: Direct cDNA Cell Lysis Buffer

产品编号: CL-0001

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产品产地: 美国

品牌商标: Signosis

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        基因表达分析的研究通常需要制备RNA,随后进行cDNA合成和PCR扩增。但大多时候,要获得大量细胞用于RNA制备是一些研究工作的瓶颈,细胞数量有限(<2000个细胞)限制了RNA的制备,特别是激光切割样本、FACS分选细胞以及96孔板培养细胞。Signosis直接用于反转录的细胞裂解液可以直接用于少量细胞反转录,而无需RNA制备。用少量细胞制得的细胞裂解产物足以很好地将RNA反转录成cDNA,从而进行PCR分析或者cDNA微孔板芯片分析。

  1. A.产品优势

      操作简单——直接用细胞裂解产物反转录,无需RNA制备;
      低样本量——少量细胞即可满足反转录及PCR需求。

  1. B.技术原理

       缓冲液已优化用于细胞裂解产物制备和反转录。cDNA合成无需RNA预分离,直接由细胞裂解产物中的RNA反转录而成。

  1. C.结果展示

 
Signosis直接用于反转录的细胞裂解液。A:比较Signosis其他厂家细胞裂解液。分别对裂解产物中的β-actin进行30个循环反转录PCR。B:基因组DNA污染检测。Lane1,细胞裂解产物不经过反转录直接对β-actin进行36个循环PCR扩增;Lane2,细胞裂解液反转录获得cDNA后对β-actin进行36个循环PCR扩增。
 
在不使用DNAse处理的情况下,分别使用Signosis的细胞裂解液和TRIzol裂解细胞,并对裂解产物进行扩增,对比扩增效果。用横跨内含子的引物进行扩增,可以区分扩增产物中的基因组DNA和反转录的mRNA。TRIzol裂解细胞的PCR扩增产物中包含一条与基因组DNA大小一致的条带以及与mRNA大小一致的条带;而在使用Signosis的细胞裂解液裂解的PCR产物中只有一条mRNA条带,没有基因组DNA污染。