T7 RNAi Transcription Kit(用于体外dsRNA 合成)-酶-试剂-生物在线
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T7 RNAi Transcription Kit(用于体外dsRNA 合成)

T7 RNAi Transcription Kit(用于体外dsRNA 合成)

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产品名称: T7 RNAi Transcription Kit(用于体外dsRNA 合成)

英文名称: T7 RNAi Transcription Kit

产品编号: TR102

产品价格: 0

产品产地: 江苏南京

品牌商标: Vazyme

更新时间: 2023-09-20T13:36:31

使用范围: null

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T7 RNAi Transcription Kit

用于体外dsRNA 合成

可以转录siRNA和长片段dsRNA;

产量高达20-80 μg;

RNA磁珠可快速高效的纯化转录产物

图1.  500 bp dsRNA 2%琼脂糖凝胶电泳图

1:DL2000 Plus DNA Marker;2和4:500 bp dsRNA酶解前后产物(双端转);3和5:  500 bp dsRNA酶解前后产物(混合转)。

图2.  siRNA 12% PAGE电泳检测结果

1:siRNA转录产物;2:siRNA转录双酶消化产物;3:单链模板;4:双链退火模板

图3. siRNA干扰绿色荧光蛋白表达

左图为GFP质粒与negative control GFP siRNA共转染24 h后的293T细胞;右图为GFP质粒和positive GFP siRNA共转染24 h后的293T细胞。

T7 RNA ploymerase可识别带有T7启动子的DNA模版,以四种NTP 为底物,体外转录合成RNA。T7 RNAi Transcription Kit 是在T7 High Yield RNA Transcription Kit 基础上为转录双链RNA 而设计优化的版本,可用于转录21 bp 的siRNA 和长片段的dsRNA。转录产物经纯化后可用于阳离子脂质体、磷酸钙共沉淀、电穿孔、DEAE- 葡聚糖及显微注射等方法介导的RNAi 实验。一般情况下,一个反应可产生20 μg-80 μg 的RNA。

 

组分

TR102-01(25 rxn)

TR102-02(50 rxn)

Box 1

T7 Enzyme Mix

50 μl

100 μl

10 × Transcription Buffer

50 μl

100 μl

10 × Annealing Buffer

250 μl

500 μl

NTP Mix

200 μl

400 μl

DNase I

25 μl

50 μl

RNase T1(100 U/μl)

25 μl

50 μl

RNase T1 Dilution Buffer

300 μl

600 μl

Control Template*

5 μl

10 μl

Box 2

RNase-free H2O

5 ml

5 ml

RNA Clean Beads

2 ml

4 ml

* 本试剂盒提供的Control Template 为500 bp 双端含T7 启动子的PCR 产物,浓度为0.5 μg/μl。

Box 1 于-20℃保存,Box 2 于4℃保存。