链球菌G蛋白（简称SPG）是G、C型链球菌细胞壁中的一种蛋白质，能特异性地同免疫球蛋白IgG分子的Fc段结合，广泛用于单克隆抗体和多克隆抗体的纯化。

使用SPG柱纯化抗体时，从柱上脱落的SPG可能成为污染物。所以对洗脱样品进行脱落SPG的检测十分必要。ELISA检测脱落SPG的过程中，样品中混杂的脱落SPG会与抗体形成SPG-IgG复合物，增大SPG定量检测的难度。因此，解除上述复合物产生的影响是准确测定脱落SPG的关键。

本试剂盒使用沸水浴处理样品，解除SPG-IgG复合物的影响。多项测试证明，煮沸后SPG不会沉淀，而IgG会产生大量沉淀而失活，同时IgG沉淀会吸附少量的SPG。因此，样品煮沸后需要将沉淀均匀打散并离心，以释放少量被吸附的SPG。同时用含有已知浓度IgG的SPG制作标准曲线，与样品进行同样的处理，排除沉淀吸附微量SPG导致的误差。

本试剂盒利用“三层夹心”原理，并预先将SPG检测用特制抗体包被在酶标板上。SPG结合酶标板后，用辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗体去结合SPG，最后用TMB显色底物进行显色。TMB在HRP的催化下转化为蓝色，并在酸的终止作用下最终转化为黄色。在一定的SPG浓度范围内，其颜色深浅与样品中SPG的含量呈正比。用酶标仪测定450 nm波长下的吸光度（OD值），根据SPG浓度标准曲线可以计算出样品中含有的脱落SPG量。