通用引物 T7-RNAi技术-试剂-生物在线
上海沪震实业有限公司
通用引物 T7

通用引物 T7

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产品名称: 通用引物 T7

英文名称: Universal primers T7

产品编号: HZ0963

产品价格: 0

产品产地: 中国/上海

品牌商标: 沪震生物

更新时间: 2023-08-17T10:24:20

使用范围: null

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通用引物 T7

中文名称:通用引物 T7

英文名称:Universal primers T7

产品规格:250μl(10uM)

 

完整RNA的提取和纯化,是进行RNA 方面的研究工作,如Nothern杂交、mRNA 分离、RT-PCR、定量PCRcDNA合成及体外翻译等的前提。所有RNA的提取过程中都有五个关键点:

1):样品细胞或组织的有效破碎;

2),有效地使核蛋白复合体变性;

3),对内源RNA酶的有效抑制;

4)有效地将RNADNA和蛋白混合物中分离;

5),对于多糖含量高的样品还牵涉到多糖杂质的有效除去。但其中最关键的是抑制RNA酶活性。

RNA的提取目前阶段主要可采用两种途径:

1),提取总核酸,再用氯化锂将RNA 沉淀出来;

2),直接在酸性条件下抽提,酸性下DNA与蛋白质进入有机相而RNA 留在水相。第一种提取方法将导致小分子量RNA的丢失,目前该方法的使用频率已很低。

质粒DNA的提取与纯化质粒是一类双链、闭环的DNA,大小范围从1 kb200 kb以上不等。通常情况下,质粒可持续稳定地处于染色体外的游离状态,具有自主复制功能;但在一定条件下也会可逆地整合到宿主染色体上,随着染色体的复制而复制,并通过细胞分裂传递到后代。

回收率能达到40%。以下几点建议:

尽量用新配制的TAE,(有人说TBE效果不好),但我用的是TBE

2 100bp片段在溶胶后要加入异丙醇,但我发现容易产生沉淀,堵柱子。但我不知Omega用的是什么溶胶液,你可以试一下:溶胶后加入与胶等体积的异丙醇,如用0.1g胶,加100ul异丙醇,再进行一下操作。

回收的样品尽量上样多一点,我一般是用4ug/100ul

探针标记各种标记物及选择方法

一、如何选择合适的一抗

二、如何选择合适的二抗

三、如何确定一抗的稀释比例

四、如何选择同型对照

五、如何选择阳性对照

核酸扩增:具有敏感性强、特异性高、快速、简便等优点,在医学、生物学等领域中得到了广泛应用。

克隆与表达:克隆载体一般是原核细菌 将需要克隆的基因与克隆载体的质粒相连接 在导入原核细菌内 质粒会在原核细菌内大量复制 形成大量的基因克隆 被克隆的基因不一定会表达。

蛋白质研究:分泌蛋白专用蛋白酶抑制剂混合液,100X( 组织培养基专用蛋白酶抑制剂混合液,100...其它蛋白质研究ELISA专用TMB显色液(双成分) HRP-链霉亲和素专用稀释液 MALDI

重组蛋白:是应用了重组DNA或重组RNA的技术从而获得的蛋白质。体外重组蛋白的生产主要包括四大系统:原核蛋白表达,哺乳动物细胞蛋白表达,酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。

基因结构和功能:基因的定点突变是重要的分子生物学技术,广泛用于载体构建、基因改造、蛋白质功能研究等领域。但传统的方法需要使用单链DNA模板,而得到单链DNA模板又需要先将基因克隆到类似M13这种载体中,操作过程冗长。

 

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!