Cell Senescence β-Galactosidase Staining Kit

细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒
产品信息
产品名称
产品编号
规格
价格
Cell Senescence β-Galactosidase Staining Kit 细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒
40754ES60
100次
780.00
产品描述
细胞衰老（Cell senescence）是细胞控制其生长潜能的保障机制，一般含义是复制衰老（Replicativesenescence，RS），指正常细胞经过有限次数的分裂后，停止分裂，此时细胞虽然是存活的，但是细胞形态和生理代谢活性发生明显变化的现象。体外衰老细胞研究常用的生物学特征包括：1）不可逆的生长停滞；2）与衰老相关的β-半乳糖苷酶（senescence associated β-galactosidase, SA β-gal）的活化。作为溶酶体内的水解酶，通常在pH 4.0的条件下表现活性。但是衰老细胞内其在pH 6.0的条件下表现活性，且随着传代次数的增加，细胞群体中表现衰老相关的β-半乳糖苷酶的细胞数目逐渐增加。
本试剂盒正是基于SA β-gal活性变化的生物学特征而设计的，专门用于对衰老细胞或组织进行染色检测的一种技术。本试剂盒以X-Gal为底物，通过细胞内SA β-gal在酸性条件下稳定表达，催化底物生成深蓝色产物，从而在光学显微镜下观察颜色变化以分析细胞的衰老状况。
本试剂盒适用于人和各种动物体外培养细胞的衰老检测。产品性能稳定，参数经优化，着色敏感。仅对衰老细胞进行染色，不会染色衰老前的细胞（presenescent cells）、静止期细胞（quiescent cells）、永生细胞（immortal cells）或肿瘤细胞。
产品组分
编号
组分
规格
保存
40754-A
清洗液A（Washing Buffer A）
60 ml
4oC保存
40754-B
固定液B（Fixative Solution B）
60 ml
4oC保存
40754-C
酸性液C（Acid Solution C）
120 ml
4oC保存
40754-D
稀释液D（Dilution Buffer D）
38 ml
4oC避光保存
40754-E
染色液E（Staining Solution E）
2 ml
-20oC避光保存
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存，一年有效，其中X-Gal溶液需避光保存。
注意事项
1） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2） 本试剂盒固定液B存在一定的腐蚀性和毒性，操作时请注意小心防护。
3）  染色液E刚刚溶解后会观察到有沉淀，属正常现象，充分混匀或者漩涡震荡可促使沉淀全部溶解，之后用于染色实验。
4）  X-Gal溶液需要避光保存。染色工作液也需要避免光照。染色后的细胞样品可以在 4oC冰箱保存，但也需避免光照。
5）  细胞β-半乳糖苷酶活性强，孵育3 h即显示阳性；细胞β-半乳糖苷酶活性弱，则需要孵育24 h。细胞染色最长孵育时间为 24 h。细胞呈现蓝色的部位即为衰老细胞特异性β-半乳糖苷酶活性部位。
6）  细胞衰老β-半乳糖苷酶染色反应依赖于特定的pH值，不能用于细胞培养的CO2培养箱中进行染色反应。因为CO2培养箱中较高浓度的CO2会影响染色工作液的pH值，导致染色失败。
7）  本试剂盒适合各种类型和规格的培养细胞：载玻片，载玻片培养皿，35 mm 培养皿和各种孔数的细胞培养板，只需按照一定的比例调整工作液用量即可（参考表2）。
使用方法
1.实验前的准备工作：
1) 染色工作液配制
实验开始前，将试剂盒内各组分从冰箱内取出，置于室温回温15~20min。其中X-Gal溶液C最好置入冰槽里等待溶化。根据以下染色工作液配方表（表1），实验体系类型，检测样本数，统一配制单次实验需要的染色工作液总量。混匀后，置入37oC恒温水槽里预热，即为染色工作液。
表1 染色工作液配方表
染色液D
10μl
染色液E
10μl
染色液F
930μl
X-Gal溶液C
50μl
注意：配制染色工作液时需使用聚丙烯（polypropylene）容器或玻璃容器，不宜使用聚苯乙烯（polystyrene）容器，对于二者的判定：聚丙烯容器可高压灭菌，而聚苯乙烯容器则不可高压灭菌，一旦高温高压处理就会严重变形。但是染色过程可以在聚苯乙烯容器内进行，如细胞培养常用的6孔板。
2）不同体系染色工作液用量
本试剂盒适合各种类型和规格的培养细胞：载玻片，载玻片培养皿，35 mm 培养皿，和各种孔数的细胞培养板，可参考下表2 调整染色工作液用量：
细胞培养类型
TUNEology 波长可调检测卡盒-->