腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)-分子生物学服务 -技术服务-生物在线
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腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)

腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)

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产品名称: 腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)

英文名称: adeno-associated virus, AAV

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腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV) 是简单的非病原单链DNA ,需要辅助病毒如腺病毒、单纯疱疹病毒存在的条件下,才能在感染的宿主细胞中复制合成装配蛋白,产生新的病毒颗粒。野生型AAV感染人宿主细胞后,可定点整合到19号染色体19q13.3qter处,该区域称AAVS1,可能与ITR和Rep蛋白的作用相关。
与腺病毒相比,腺相关病毒免疫原性较低,有多种血清型,可感染不同组织的细胞。AAV2是目前应用最广的腺相关病毒,对多数常见细胞均有较好效果。AAV-2是天然缺陷型病毒(生产性感染依赖于几个额外的反式因子),并且目前还没有发现它和任何的人类疾病有关联。在吉满生物使用的AAV Helper-Free System中,AAV-2 反向重复(ITR)序列和rep/cap基因分别位于缺少共同序列的单独的质粒上,以阻止生产出重组野生型病毒。
AAV Helper-Free System利用已经明确用于调节AAV复制和表达的腺病毒基因产物,并且这些基因产物能通过转染引进宿主细胞。在AAV Helper-Free System中,生产具感染性的AAV病毒颗粒所需的腺病毒基因产物(例如:E2A,E4和VA RNA基因)大部分由pHelper质粒提供,其余的腺病毒基因产物由稳定表达腺病毒E1基因的AAV-293宿主细胞提供。本系统包括通过改良HEK293腺相关病毒生产能力而衍生出的AAV-293细胞。通过消除对活的辅助病毒的需求,AAV Helper-Free System提供一个更安全,更纯净和更便利的替代逆转录病毒和腺病毒的基因传递系统。

腺相关病毒服务类型:
优势:
  • 宿主细胞范围广:腺相关病毒可以感染广泛的哺乳动物细胞
  • 高滴度:可以生产出≥1012 v.g. /ml的高滴度病毒
  • 重组腺相关病毒能感染分裂期和非分裂期细胞
  • 表达出的人类蛋白质可以正确的折叠和修饰
血清型:

吉满生物在包装腺相关病毒时有多种不同的AAV血清型可供客户选择,建议客户针对不同组织器官选择相应血清型的AAV病毒,见下表。

血清型 组织亲和性
AAV1 中枢神经,肌肉,肝脏,脑组织,眼
AAV3 肌肉,肝脏,肺,眼
AAV4 中枢神经,肌肉,眼,脑
AAV5 肺,眼,中枢神经,关节滑膜,胰腺
AAV6 肺,心脏
AAV7 肌肉,肝脏
AAV8 肝脏,眼,中枢神经,肌肉
AAV9 心脏,肌肉,肺(肺泡),肝脏,中枢神经
DJ 视网膜,肝脏,肺,肾脏
DJ/8 大脑组织,其他离体组织


AAV的血清型是指目前已发现的不同衣壳蛋白的数十种AAV在体内产生不同的抗血清类型,它们对相同的组织和细胞具有不同的感染效率。

Cell Line AAV-1 AAV-2 AAV-3 AAV-4 AAV-5 AAV-6 AAV-8 AAV-9 AAV-DJ AAV-DJ/8
Huh-7 13 100 2.5 0.0 0.1 10 0.7 0.0 500 0.2
HEK293 25 100 2.5 0.1 0.1 5 0.7 0.1 500 0.3
HeLa 3 100 2.0 0.1 6.7 1 0.2 0.1 667 0.2
HepG2 3 100 16.7 0.3 1.7 5 0.3 ND 1250 0.5
Hep1A 20 100 0.2 1.0 0.1 1 0.2 0.0 400 0.1
911 17 100 11 0.2 0.1 17 0.1 ND 500 0.0
CHO 100 100 14 1.4 333 50 10 1.0 25000 5.0
COS 33 100 33 3.3 5.0 14 2.0 0.5 500 0.3
MeWo 10 100 20 0.3 6.7 10 1.0 0.2 2857 1.0
NIH3T3 10 100 2.9 2.9 0.3 10 0.3 ND 500 0.1
A549 14 100 20 ND 0.5 10 0.5 0.1 1000 0.1
HT1180 20 100 10 0.1 0.3 33 0.5 0.1 333 0.2
Monocytes 1111 100 ND ND 125 1429 ND ND 100 ND
Immature DC 2500 100 ND ND 222 2857 ND ND 200 ND
Mature DC 2222 100 ND ND 333 3333 ND ND 100 ND

 AAV-2 作为标准,感染效率为 100. ND =未检测

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